相關文章 / article
簡要描述:小鼠瘦素(LEP)ELISA Kit試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被活性氧抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品活性
小鼠ELISA試劑盒的實驗原理:
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELIAS)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等有點。
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。馬上進行實驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NAN3的樣品,因NAN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作程序
準備試劑、樣品和標準品→→加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘→→洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘→→洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色10分鐘→→加入終止液→→15分鐘內讀OD值→→計算
小鼠ELISA試劑盒的注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被開封后如未使用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各布加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免實驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高)(樣品OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(N倍)后再測定計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×N×5)。
5.封板膜只限一次使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存
7.嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃;
2.有效期:6個月。
上一篇:小鼠苗條素受體